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DISPASE® 是切断肽链的中性及非极性氨基酸N末端的金属蛋白酶,能够把上皮细胞从组织上剥离成片状,可用于原代培养的细胞分离与分散。与胰蛋白酶和胶原酶等蛋白酶不同,DISPASE®造成的细胞损伤更少,可温和地分散细胞,因此也被应用于ES和iPS细胞等再生医学领域。
◆优点、特色
1. 来源于Paenibacillus sp. (旧名:Bacillus polymyxa)的中性金属蛋白酶,活性中心含有Zn2+, 并使用Ca2+ 稳定其活性。
2. 酶活性几乎不受血清影响,无论有无血清均可使用。通过添加EDTA或者稀释反应液即可停止酶促反应。
3. 可以很好地分解构成基底膜的IV型胶原、纤连蛋白,让上皮细胞从组织上剥离成片状。
4. 与胰蛋白酶、胶原酶等蛋白酶的作用不同,造成的细胞损伤更少,可温和地分散细胞。
5. 作用条件范围广泛,可以在不同的酶浓度、处理时间、温度以及pH条件下起作用。
6. 在一般细胞培养温度(37°C)下非常稳定,对于某些细胞类型,添加本产品可实现悬浮培养。
7. 无动物源成分,不含支原体。
◆作用条件
| 酶浓度 | 100~2,000 PU/mL |
| 溶解buffer | 含有Ca2+的缓冲液或者培养基(可含有血清) |
| 反应时间 | 30 min~几天 |
| 反应温度 | 室温~37℃ |
| 反应pH | 6.5~9.0 |
| 抑制剂 | EDTA, Fe3+, Fe2+, Ni2+, Cu2+, Al3+, Zn2+ |
※ 1 PU的定义是使用酪蛋白分解法1 min内释放1 μg酪氨酸的酶活性。

◆细胞分散实验

| DISPASE® I | DISPASE® II | |
| 特性 | 结晶酶,无菌产品 | 粉末酶,非无菌产品 |
| 包装 | 6 小瓶 | 1 g |
| 酶活性 | 10,000-13,000 PU/小瓶 | 300,000-360,000 PU/g |
| 添加剂等 | 含有醋酸钙 | 含有糊精和醋酸钙 |
| 储存方法 及有效期 |
生产后在 2~10℃下可储存 2年(未开封); 开封溶解后请冻存在-20℃以下,并在 6个月内使用。 |
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